SCD-Universite de Rennes 1 Impact des forces de tension sur le phénotype hépatocytaire in vitro : caractérisation de la matrice de collagène dans la fibrose hépatique par microscopie SHG Impact of tensile strength on hepatocyte phenotype in vitro : characterization of collagen matrix in liver fibrosis by SHG microscopy Rigidité matriciellefibrose hépatiqueculture in vitro 3Dmicroscopie SHGphénotype hépatique stiffness matrixliver fibrosisin vitro 3D culturesSHG microscopyhepatic phenotype FoieFibroseThèses et écrits académiques CollagèneThèses et écrits académiques La fibrose hépatique est un problème de santé publique. Cette pathologie est caractérisée par une accumulation excessive de matrice extracellulaire, composée principalement de collagène, augmentant la rigidité du foie. Environ 90% des hépatocarcinomes se développent sur un foie fibrotique / cirrhotique, laissant présager une relation entre la rigidité tissulaire et le développement tumoral. Pour étudier le rôle des forces exercées par la matrice extracellulaire sur le phénotype des cellules hépatiques, nous avons développé un modèle de culture 3D de cellules hépatiques dans des gels de collagène de rigidités variables. Dans ces conditions, les cellules hépatiques présentent une forte prolifération et un maintien de la différenciation dans les matrices les plus rigides. En parallèle, les cellules hépatiques transformées peuvent modifier la matrice de collagène pour former des signatures de collagène TACS (Tumor Associated Collagen Signatures). Une analyse des voies de signalisation impliquées dans la formation des TACS 3 nous a permis de déterminer 2 voies indispensables pour ces mécanismes: MEK/ERK et MLCK. Le bon maintien des fonctions différenciées et de biotransformation des cellules hépatiques font des cultures 3D en gel de collagène un excellent modèle pour des applications en biotechnologie. Nous avons également développé une technique de quantification standardisée et automatisée du collagène, dans un modèle murin de fibrose hépatique, par utilisation de la microscopie SHG, qui permet de détecter de faibles variations de quantité de collagène. Cette technique permet également de caractériser qualitativement, après analyse d'images, le collagène et de renforcer la discrimination entre les différents stades fibrotiques. La caractérisation des cross-links de collagène, par cette approche, est actuellement en cours d'étude et permettrait d'appréhender les capacités de réversion. Liver fibrosis is a real public health problem. This pathology is characterized by an excessive accumulation of extracellular matrix, mainly composed of collagen, increasing liver rigidity. Approximately 90% of hepatocellular carcinomas develop from a fibrotic/cirrhotic liver, suggesting a relationship between tissue rigidity and tumor development. To investigate the role of stiffness on the hepatic phenotype, we have developed a 3D culture model of collagen gels of varying stiffness. Our results show a better survival, an increase of proliferation and differentiation of liver cells in rigid matrices. In addition, the cells are able to modify the collagen matrix and to form collagen signatures TACS (Tumor Associated Collagen Signatures). An analysis of the signaling pathways involved in the formation of TACS 3 allowed us to determine that 2 pathways are important for these mechanisms: MEK/ERK and MLCK. The high level of differentiated functions and biotransformation of the hepatic cells make 3D collagen cultures an excellent model for applications in biotechnology. Using the SHG microscopy, we have also developed a standardized and automated quantification of collagen to detect small amount of collagen in a mouse liver fibrosis model. This technique allows us to characterize qualitatively the collagen and to strengthen the discrimination between fibrotic scores. The characterization of the collagen cross-links by this approach is under study and would allow to study the reversion capacity. Electronic Thesis or DissertationText fr application/pdf1 : 13874 Kohttps://ecm.univ-rennes1.fr/nuxeo/site/esupversions/a88b22ac-cf9a-4c54-bf60-987e28a87528 Bomo Jérémy 1986-08-20 FR 187108838 12023041 bomo.jeremy53@wanadoo.fr 2014REN1S163 http://www.theses.fr/2014REN1S163 2014-12-15 Biologie Universite de Rennes 1thesis.degree.grantor_1 02778715X Doctorat Université européenne de BretagnepartenaireRecherche_1 139075119 non ouiBaffetGeorgesintervenant_1079494919ThéretNathalieintervenant_2118318020 Vie-Agro-SantéecoleDoctorale_1 13908620X IRSETpartenaireRecherche_2 177984775 ddc:610 BaffetGeorgesThéretNathalieUniversite de Rennes 1Sciences et technologie, medecine, pharmacie, odontologie, droit, economie, gestion, philosophieVie-Agro-SantéÉcole doctorale Vie-Agro-Santé (Rennes)Université européenne de Bretagne Pôle de recherche et d'enseignement supérieur de Bretagne IRSET ASCII PDF 14207430 restriction 2014-12-15 2015-06-15 restriction 2014-12-15 2015-06-15