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| Étude d’acides ribonucléiques régulant la virulence de Staphylococcus aureus dans le modèle invertébré Galleria mellonella (Insight into ribonucleic acids regulating the virulence of Staphylococcus aureus in the invertebrate model Galleria mellonella) | ||
Ménard, Guillaume - (2021-10-21) / Universite de Rennes 1 - Étude d’acides ribonucléiques régulant la virulence de Staphylococcus aureus dans le modèle invertébré Galleria mellonella Langue : Français, Anglais Directeur de thèse: Donnio, Pierre-Yves; Rouillon, Astrid Laboratoire : ARN régulateurs bactériens et médecine (BRM) Ecole Doctorale : Biologie-Santé Thématique : Médecine et santé | ||
Mots-clés : Staphylococcus aureus, Galleria mellonella, virulence, ARNrégulateurs, Staphylocoque doré, Pyralidés, Virulence (microbiologie), ARN régulateur Résumé : Les ARN régulateurs (ARNreg) jouent un rôle central dans les réseaux de régulation bactériens. Chez Staphylococcus aureus, beaucoup sont décrits mais seulement un faible nombre sont rattachés à la régulation de la virulence avec des données parcellaires sur leur expression in vivo. Ce manque témoigne de la difficulté d’obtenir de tels résultats. Nous avons donc développé un modèle d'infection alternatif en utilisant la larve Galleria mellonella pour analyser les rôles des ARNreg de S. aureus au cours de l'infection et déterminer l'implication éventuelle de certains ARNreg dans la virulence staphylococcique. Après avoir développé ce modèle d’infection sur des aspects microbiologiques et histopathologiques, nous avons mesuré l’expression d’ARNreg in situ en cours d’infection. Les profils d'expression des ARNreg testés étaient distincts et fluctuaient dans le temps. L'expression de sprD et sprC augmentait progressivement pendant l'infection et était associée à la mortalité, tandis que l'expression de l’ARNIII restait à peine détectable dans le temps. Une forte corrélation a été observée entre l'expression de sprD et la mortalité. Pour confirmer ces observations préliminaires, nous avons relié les résultats d’expression à la pathogénèse de S. au-reus par utilisation de souches délétées pour certains ARNreg. Nous avons constaté que la mortalité était diminuée lorsque sprD et sprC étaient absents. Ces résultats démontrent la pertinence de ce modèle pour étudier le rôle des ARNreg impliqués dans la virulence de S. au-reus. Ce modèle constitue une méthode rapide et facile pour déterminer la participation des ARNreg dans la pathogenèse de S. aureus. Résumé (anglais) : Small regulatory RNAs (sRNAs) are key players in bacterial regulatory networks. Monitoring their expression inside living colonized or infected organisms is essential for identifying sRNA functions, but few studies have looked at sRNA expression during host infection with bacterial pathogens. Insufficient in vivo studies monitoring sRNA expression attest to the difficulties in collecting such data, we therefore developed a non-mammalian infection model using larval Galleria mellonella to analyze the roles of Staphylococcus aureus sRNAs dur-ing larval infection and to quickly determine possible sRNA involvement in staphylococcal virulence. We began by using the model to test infected larvae for immunohistochemical evidence of infection as well as host inflammatory responses over time. The expression profiles of the tested sRNAs were distinct and they fluctuated over time, with expression of both sprD and sprC increased during infection and associated with mortality, while rnaIII expression was stayed barely detectable over time. A strong correlation was observed between sprD expression and the mortality. To confirm these results, we used sRNA-knockout mutants to investigate sRNA involvement in Staphylo-coccus aureus pathogenesis, finding that the decrease in death rates is delayed when either sprD or sprC was lacking. These results demon-strate the relevance of this G. mellonella model for investigating the role of sRNAs as transcriptional regulators involved in staphylococcal virulence. This insect model provides a fast and easy method for monitoring sRNA (and mRNA) participation in S. aureus pathogenesis. Identifiant : rennes1-ori-wf-1-15605 | ||
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